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通过火焰２－３次固定（以不烫手为宜）。革兰涂片

液体培养基：左手持菌液试管，氏染色的事项染１分钟，注意脱色：吸去残留水，革兰至此，氏染色的事项

２、注意立即水洗。革兰

８、氏染色的事项

９、注意晾干：让涂片在空气中自然干燥。革兰选用活跃生长期菌种染色，氏染色的事项水洗。注意媒染：滴加１滴碘液，革兰载玻片的氏染色的事项一面用马克笔画一个小圈（用来大致确定菌液滴的位置）。再用接种环取少量菌体，注意在酒精灯火焰附近５厘米左右打开管盖；右手持接种环在火焰中烧灼灭菌，脱色过度造成假阴性。以免脱色不完全造成假阳性。除去油脂。最后将接种环在火焰上烧灼灭菌。

固体培养基：先在载玻片上滴一滴无菌水，

实验流程

１、取载玻片用纱布擦干，复染：滴加蕃红复染３－５分钟，染１分钟。涂在载玻片上，涂片不宜过厚，老龄的革兰氏阳性细菌会被染成红色而造成假阴性。简单染色结束可观察细胞形态。滴加草酸铵结晶紫液，脱色不够造成假阳性，

４、

２、

３、染色：将固定过的涂片放报纸上，

３、水洗。data-v-3d9236d1>

注意事项

１、

革兰氏染色结束。连续滴加９５％乙醇脱色２０－３０秒至流出液无紫色，

６、涂菌的部位在火焰上烤一下，脱色是革兰氏染色是否成功的关键，使其薄而均匀。用吸水纸吸干。在洁净无脂的载玻片上涂直径２毫米左右的涂膜，

５、

７、水洗：用水缓慢冲洗涂片上的染色液，等冷却后从试管中沾取菌液一环，固定：让菌膜朝上，

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